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一文看懂兔溶菌酶檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)步驟

發(fā)布時(shí)間: 2024-12-23  點(diǎn)擊次數(shù): 180次
  兔溶菌酶檢測(cè)試劑盒檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
  試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
  兔溶菌酶檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)步驟:
  1、準(zhǔn)備工作:將試劑、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品等達(dá)到室溫,并確保所有試劑和設(shè)備準(zhǔn)備就緒。
  2、樣品處理:將待測(cè)樣品和標(biāo)準(zhǔn)品加入預(yù)先涂有捕獲抗體的酶標(biāo)板孔中,使活化素與捕獲抗體結(jié)合。
  3、洗滌:通過(guò)洗滌步驟去除未結(jié)合的物質(zhì),以減少非特異性信號(hào)。
  4、檢測(cè)抗體結(jié)合:加入標(biāo)記有酶的檢測(cè)抗體,使其與已結(jié)合的活化素形成復(fù)合物。
  5、再次洗滌:去除未結(jié)合的檢測(cè)抗體。
  6、顯色反應(yīng):加入顯色底物,使酶催化底物反應(yīng)產(chǎn)生可測(cè)量的顏色。
  7、反應(yīng)終止:通過(guò)加入反應(yīng)終止劑,停止顯色反應(yīng)。
  8、測(cè)量信號(hào):使用光度計(jì)測(cè)量吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)確定樣品中活化素的濃度。
  兔溶菌酶檢測(cè)試劑盒的原理基于活化素與特異性抗體的結(jié)合,并利用酶的催化作用產(chǎn)生可測(cè)量的信號(hào)。通過(guò)比較待測(cè)樣品的信號(hào)與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上的標(biāo)準(zhǔn)品信號(hào),可以確定樣品中活化素的濃度。具體的操作步驟和原理可能因不同的試劑盒品牌和制造商而有所不同,因此,在使用兔溶菌酶檢測(cè)試劑盒之前,建議仔細(xì)閱讀試劑盒的說(shuō)明書(shū)和制造商提供的指南,并遵循其建議和要求。
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